尺寸排阻色譜柱是一種廣泛應(yīng)用于生物分析領(lǐng)域的工具，其工作原理主要基于分子大小差異進(jìn)行分離。利用柱內(nèi)固定相中孔隙與分子間的物理作用來(lái)實(shí)現(xiàn)分離。具體來(lái)說(shuō)，聚合物分子在柱子中的孔道中被篩選，較大的分子無(wú)法通過(guò)尺寸較小的孔道，只有較小的分子才能通過(guò)這些孔道，從而實(shí)現(xiàn)不同分子尺寸的分離。

　　使用尺寸排阻色譜柱時(shí)，需要注意以下幾個(gè)關(guān)鍵事項(xiàng)：

　　1、流動(dòng)相的選擇：流動(dòng)相應(yīng)根據(jù)樣品的溶解性來(lái)選擇，它應(yīng)與凝膠本身具有相似性，同時(shí)要求黏度低，與樣品的折光率有較大差異。這樣可以確保流動(dòng)相能夠潤(rùn)濕凝膠并防止吸附作用的發(fā)生。

　　2、進(jìn)樣量控制：對(duì)于體積排阻色譜來(lái)說(shuō)，進(jìn)樣量不宜超過(guò)柱體積的5%。例如，一根規(guī)格為300 x 7.8mm的色譜柱的柱體積約為14mL，因此進(jìn)樣量不應(yīng)超過(guò)700uL。控制適當(dāng)?shù)倪M(jìn)樣量是保證分離效果和避免柱子過(guò)載的重要條件。

　　3、樣品的準(zhǔn)備：在注入樣品之前，需要確保樣品已經(jīng)被適當(dāng)?shù)厝芙獠⑶疫^(guò)濾，以避免固體顆?；蛭慈芙獾奈镔|(zhì)對(duì)色譜柱造成損害。

　　4、溫度的控制：尺寸排阻色譜通常需要在恒溫條件下進(jìn)行，以保持色譜柱的穩(wěn)定性和提高分離效率。

　　5、色譜柱的維護(hù)：使用后應(yīng)及時(shí)清洗色譜柱，以去除殘留的樣品和流動(dòng)相，防止柱內(nèi)發(fā)生堵塞或微生物生長(zhǎng)。

　　6、系統(tǒng)監(jiān)測(cè)：在操作過(guò)程中，應(yīng)密切監(jiān)控系統(tǒng)壓力和檢測(cè)器響應(yīng)，以便及時(shí)發(fā)現(xiàn)任何異常情況并采取相應(yīng)措施。

　　綜上所述，通過(guò)遵循這些注意事項(xiàng)，可以確保尺寸排阻色譜柱的有效使用，同時(shí)也能延長(zhǎng)其使用壽命，獲得可靠的分析結(jié)果。在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前，還應(yīng)仔細(xì)閱讀色譜柱的使用說(shuō)明書(shū)，以了解更詳細(xì)的操作指南和建議。